Beer-Lambertの法則がキュベット選定を決める仕組み — 一般的な分析対象の推奨光路長 — そして信頼できる吸光度ウィンドウに留まる方法。
A = ε · c · l。信頼できる結果のため、吸光度は0.2〜1.5のウィンドウにあるべきです。0.2未満ではS/N比が悪く、1.5超では迷光と検出器の非線形性が読み取り値を歪めます。光路長の選択が吸光度を範囲内に保つレバーです。
| 分析対象 / 用途 | 一般的な濃度 | 推奨光路長 |
|---|---|---|
| 二本鎖DNA（260nm） | 1 – 50 µg/mL | 10mm標準 |
| タンパク質（280nm） | 0.1 – 2 mg/mL | 10mm標準 |
| NADH酵素アッセイ（340nm） | 10 – 200 µM | 10mm |
| 高濃度色素溶液 | 高ε | 1 – 5mm（または希釈） |
| 微量元素 / 極希釈 | ppb – 低ppm | 20 – 100mm長光路 |
| 貴重な微量サンプル | 任意 | 10mm、20 – 200µL超微量 |
光路長計算機を使ってl = A/(ε·c)を計算してください。結果が10mmなら標準セルで十分、50mm必要なら長光路セルまたはサンプルの濃縮を検討してください。
| 光路長 | サンプル量 | scuvetteセル |
|---|---|---|
| 10 mm | 20 – 200 µL | 超微量 |
| 10 mm | 0.7 – 3.5 mL | 標準 / マイクロ |
| 20 – 100 mm | 4 – 40 mL | 長光路 |
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A = εcl — 吸光度は光路長 l と濃度 c に比例します。Aが正確な0.1–1.0の範囲に収まるよう光路長を選びます。光路長ガイド。
より短い光路（1–5 mm）にするか希釈してください。ショートパスが clean なことが多いです。ショートパスキュベット。
より長い光路にするか試料を濃縮してください。ロングパスキュベット。
extinction係数 ε は1 cm（10 mm）で定義されるため、公開手法はこれを前提とします。10 mmセル。
透過しない波長のみで影響します — 石英は350 nm以下、ガラスはそれ以上。波長に合わせて材質を選んでください。石英 vs ガラス。
非常に長い光路は散乱光誤差を増幅します。Aは約2.0以下に保ってください。トラブルシューティング。