Un guide pratique pour les problèmes UV-Vis : lignes de base bruitées, dérive, pics, mauvaise répétabilité — avec les solutions de cellule à essayer avant d’appeler le service.
| Symptôme | Causes les plus probables | Première solution |
|---|---|---|
| Ligne de base bruitée | Vieillissement de la lampe, fenêtres sales, bulles d’air dans la cellule | Nettoyer les cellules ; dégazer l’échantillon ; vérifier les heures de lampe |
| Dérive de ligne de base | Préchauffage incomplet, changement de température | Préchauffer 30 min ; contrôler la température du labo |
| Pics d’absorbance | Bulles d’air, particules dans le faisceau, cellule mal posée | Taper/remplir la cellule ; vérifier l’alignement ; filtrer l’échantillon |
| Mauvaise répétabilité | Orientation de la cellule, évaporation, fenêtres sales | Marquer l’orientation ; couvrir la cellule ; nettoyer les fenêtres |
| Lectures négatives | Erreur de blanc, cellule de référence sale | Voir le guide d’absorbance négative |
| Signal plat/faible | Mauvaise dimension Z, cellule trop vide | Vérifier la dimension Z ; remplir au-dessus du faisceau |
Si la ligne de base de l’instrument est propre avec des cellules vides mais se dégrade avec une cellule spécifique, le problème est la cellule — généralement une fenêtre rayée, une surface gravée ou une ligne de colle défaillante. Le remplacement coûte moins cher qu’une visite de service. Soupçonnez un problème de cellule ? Envoyez-nous une photo de la ligne de base et nous aiderons à diagnostiquer.
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Généralement la cuve est sale, rayée ou présente des empreintes de doigts/du gras sur les fenêtres. Nettoyez à nouveau la cuve, manipulez-la par la face mate, et vérifiez que la référence (blanc) est correcte et identique à la cuve d'échantillon.
Les causes fréquentes sont des bulles d'air dans le faisceau, une fenêtre tachée ou rayée, une longueur de trajet incorrecte ou l'utilisation d'une cuve en verre en UV. Dégazez l'échantillon, nettoyez à nouveau la cuve et utilisez une cuve en quartz pour les mesures UV.
Effectuez une vérification rapide de la cuve : insérez une cuve de référence connue avec le même blanc, comparez le même échantillon dans deux cuves identiques, et inspectez les fenêtres sous lumière. Si la panne suit la cuve, c'est un problème de cuve ; si elle persiste avec une cuve propre, vérifiez la lampe, l'étalonnage en longueur d'onde et l'alignement du porte-cuves.
Uniquement après un nettoyage approfondi. Les précipités (sels, protéines) laissent des films qui augmentent l'absorbance de base. Faites tremper et rincez jusqu'à ce que les fenêtres soient claires sous lumière vive ; s'il reste des traces d'attaque ou des rayures, retirez la cuve des mesures quantitatives.
Une absorbance négative signifie que l'échantillon transmet plus que la référence. Cela arrive quand le blanc et l'échantillon sont inversés, que la cuve de référence est plus sale que la cuve d'échantillon, ou que les cuves ne correspondent pas. Refaites la mesure avec un blanc correctement préparé en position de référence.