Una guía práctica para problemas de UV-Vis: líneas base ruidosas, deriva, picos, mala repetibilidad — con las soluciones de celda que puede probar antes de llamar al servicio técnico.
| Síntoma | Causas más probables | Primera solución |
|---|---|---|
| Línea base ruidosa | Lámpara envejecida, ventanas sucias, burbujas de aire en la celda | Limpie las celdas; desgasifique la muestra; compruebe las horas de la lámpara |
| Deriva de línea base en el tiempo | Calentamiento incompleto, cambio de temperatura | Caliente 30 min; controle la temperatura del laboratorio |
| Picos de absorbancia | Burbujas de aire, partículas en la trayectoria del haz, celda mal asentada | Golpee/llene la celda; compruebe la alineación; filtre la muestra |
| Mala repetibilidad | Orientación de la celda, evaporación, ventanas sucias | Marque la orientación; cubra la celda; limpie las ventanas |
| Lecturas negativas | Desajuste del blanco, celda de referencia sucia | Vea la guía de absorbancia negativa |
| Señal plana/baja | Dimensión Z incorrecta, celda demasiado vacía | Compruebe la dimensión Z; llene por encima del haz |
Si la línea base del instrumento es limpia con celdas vacías pero se degrada con una celda específica, el problema es la celda — normalmente una ventana rayada, una superficie grabada o una línea de pegamento fallando. Reemplazarla es más barato que una visita de servicio. ¿Sospecha un problema de celda? Envíenos una foto de la línea base y ayudaremos a diagnosticar.
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Normalmente la cubeta está sucia, rayada o tiene huellas dactilares/grasa en las ventanas. Vuelva a limpiar la cubeta, manipúlela por el lado mate e verifique que la referencia (blanco) sea correcta y coincida con la cubeta de muestra.
Las causas habituales son burbujas de aire en el haz, una ventana manchada o rayada, una distancia óptica incorrecta o el uso de una cubeta de vidrio en el rango UV. Desgasifique la muestra, vuelva a limpiar la cubeta y use una cubeta de cuarzo para mediciones UV.
Haga una comprobación rápida de la cubeta: coloque una cubeta de referencia conocida con el mismo blanco, compare la misma muestra en dos cubetas idénticas e inspeccione las ventanas bajo luz. Si el fallo acompaña a la cubeta, es un problema de cubeta; si persiste con una cubeta limpia, revise la lámpara, la calibración de longitud de onda y la alineación del portacubetas.
Solo tras una limpieza a fondo. Los precipitados (sales, proteínas) dejan películas que elevan la absorbancia de base. Deje en remojo y enjuague hasta que las ventanas estén claras bajo luz intensa; si quedan marcas de ataque o rayas, retire la cubeta de los trabajos cuantitativos.
Una absorbancia negativa significa que la muestra transmite más que la referencia. Ocurre cuando se invierten el blanco y la muestra, la cubeta de referencia está más sucia que la de muestra, o las cubetas no coinciden. Repita con un blanco preparado correctamente en la posición de referencia.