La fluorescencia se mide en ángulo recto, lo que cambia la cubeta que necesita. A continuación le explicamos cómo elegir una celda que maximice la señal y minimice el fondo.
La espectroscopía de fluorescencia detecta la luz emitida en ángulo recto respecto al haz de excitación. Ese único hecho geométrico condiciona casi todas las decisiones que tomará sobre la cubeta: número de ventanas, enmascarado, material y sellado.
Una celda de absorbancia estándar solo necesita dos ventanas pulidas opuestas: la luz la atraviesa en línea recta. La fluorescencia, en cambio, recoge la luz perpendicular al recorrido de excitación, por lo que las caras laterales también deben estar pulidas ópticamente:
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La fluorescencia suele dirigirse a fluoróforos excitados por UV, por lo que la celda debe transmitir en el UV profundo. sílice fundida de grado UV lejano JGS1 transmite desde ~200 nm a través del rango visible y es el estándar para el trabajo de fluorescencia. El vidrio óptico económico corta por debajo de ~320 nm y bloqueará la excitación UV de la que depende.
Todas las cubetas de fluorescencia de Scuvette se fabrican de serie en sílice fundida JGS1, con alta transmisión y paralelismo de precisión.
La luz de excitación parásita que llega al detector es el enemigo de una señal de fluorescencia limpia. Una celda de pared negra enmascara dos paredes laterales opuestas (dejando despejadas las ventanas ópticas), lo que:
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La fluorescencia se mide en ángulo recto: el haz de excitación entra por una ventana y la luz emitida se recoge por una ventana perpendicular. Una cubeta de cuatro ventanas tiene los cuatro lados pulidos, por lo que se puede usar en cualquier orientación y también para mediciones de absorbancia a lo largo de dos ejes.
Una cubeta de pared negra tiene dos paredes laterales opuestas enmascaradas en negro, dejando libres las ventanas ópticas. Bloquea la luz de excitación dispersa que entra en el detector, lo que reduce el ruido de fondo y mejora la relación señal-ruido en mediciones de fluorescencia de bajo volumen y señal débil.
La sílice fundida de grado UV lejano JGS1 es el estándar para la fluorescencia gracias a su alta transmisión desde ~200 nm hasta el rango visible. Todas las cubetas de fluorescencia de Scuvette se fabrican con sílice fundida JGS1.