Beer-Lambert 법칙이 큐벳 선택을 결정하는 방법 — 일반 분석물의 권장 광로 길이 — 그리고 신뢰할 수 있는 흡광도 창 안에 머무는 방법.
A = ε · c · l. 신뢰할 수 있는 결과를 위해 흡광도는 0.2 – 1.5 창 안에 있어야 합니다. 0.2 미만이면 신호 대 잡음비가 나쁘고, 1.5 초과이면 산란광과 검출기 비선형성이 판독값을 왜곡합니다. 광로 길이 선택이 흡광도를 범위 안에 유지하는 레버입니다.
| 분석물 / 응용 | 일반 농도 | 권장 광로 길이 |
|---|---|---|
| 이중가닥 DNA (260nm) | 1 – 50 µg/mL | 10mm 표준 |
| 단백질 (280nm) | 0.1 – 2 mg/mL | 10mm 표준 |
| NADH 효소 분석 (340nm) | 10 – 200 µM | 10mm |
| 고농도 염료 용액 | 높은 ε | 1 – 5mm (또는 희석) |
| 미량 금속 / 매우 묽은 시료 | ppb – 낮은 ppm | 20 – 100mm 장광로 |
| 귀중한 미량 시료 | 무관 | 10mm, 20 – 200µL 초소량 |
광로 길이 계산기를 사용해 l = A/(ε·c)를 계산하세요. 결과가 10mm면 표준 셀로 충분하고, 50mm가 필요하면 장광로 셀 또는 시료 농축을 고려하세요.
| 광로 길이 | 시료 부피 | scuvette 셀 |
|---|---|---|
| 10 mm | 20 – 200 µL | 초소량 |
| 10 mm | 0.7 – 3.5 mL | 표준 / 마이크로 |
| 20 – 100 mm | 4 – 40 mL | 장광로 |
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A = εcl — 흡광도는 광경로 l과 농도 c에 비례합니다. A가 정확한 0.1–1.0 범위에 들도록 광경로를 선택하세요. 광경로 길이 가이드.
더 짧은 광경로(1–5 mm)로 하거나 희석하세요. 숏패스가 깔끔한 경우가 많습니다. 숏패스 큐벳.
더 긴 광경로로 하거나 시료를 농축하세요. 롱패스 큐벳.
소멸 계수 ε은 1 cm(10 mm)에서 정의되므로 공개된 방법은 이를 전제로 합니다. 10 mm 셀.
투과하지 않는 파장에서만 영향 — 석영은 350 nm 미만, 유리는 그 이상. 파장에 맞춰 재질을 선택하세요. 석영 vs 유리.
매우 긴 광경로는 산란광 오차를 증폭합니다. A는 약 2.0 이하로 유지하세요. 문제 해결.